五味沙棘散为蒙古族验方，为临床蒙医常用药，由沙棘膏、栀子、木香、甘草、白葡萄干5味蒙药制成，具有止咳定喘、清热祛痰功效。临床主要用于肺热久嗽，喘促痰多，胸中满闷，胸胁作痛；急、慢性支气管炎见上述证候者⋯。经过大量的临床实践证明，该验方作用确实，疗效可靠，且未见有任何不良反应。为了阐明其疗效的理论基础，蒙医蒙药网对此进行了止咳、平喘、抗炎及急性毒性作用的实验研究，为临床用药提供药效学依据。
1 实验资料
1.1材料选择昆明种小鼠，体质量(20±2)g；豚鼠，体质量(180±20)g，雌雄各半，均由内蒙古民族大学动物室提供。五味沙棘散，由内蒙古民族大学附属医院提供，批号071213；桂龙咳喘宁胶囊，桂龙药业(安徽)有限公司生产，批号070304；地塞米松片，天津药业集团有限公司生产，批号020618。CC2170A型恒压超声雾化器(中外合资成都维信电子科大新技术有限公司生产)；BL一420E生物信号分析系统(成都泰盟)；荧光显微镜(上海)。
1.2实验方法
1.2.1对小鼠氨水引咳实验。选用符合标准的小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分别为阴性对照组(等体积生理盐水)，五味沙棘散低、中、高剂量组(0.5，1.0，2.09／ks)及桂龙咳喘宁组(0.75 g/L)。以上5组均灌胃给药。1次／d，连续5 d。末次给药后1 h进行氨水引咳实验。即逐次将每只小鼠放入特制的透明固定容器中，稳定1 min后用超声波雾化吸入器以恒定压力匀速将280 mL／L的氨水喷入容器内，喷雾时问为10 s。观察记录每只小鼠的咳嗽潜伏期(s)和2min内的咳嗽次数(注：小鼠咳嗽的判断以剧烈收缩腹肌并张嘴为准，有时可听到轻微咳嗽声)。
1.2.2对豚鼠离体气管条实验。将实验豚鼠处死，分离并取下气管，切成螺旋条，置于充有Krebs—Henaeleit液的恒温气管浴槽中，组织保持在37℃，2 g前负荷，并充入含95％Q的混合气体。气管条的收缩经张力换能传感器传导并记录至BL一420E生物信号分析系统上。加入药物前稳定2 min。分组及给药剂量同1．2．1，2min后加入10-69／mL组胺，10min后反应达到最大值。以阴性对照组曲线最大高度为100％，计算样品相对收缩高度。
1.2.3对小鼠慢性支气管炎模型实验一被动吸烟法。选用合格小鼠50只，雌雄各半，先将动物编号，再按随机抽样。分为5组。正常对照组，模型组(都给同体积生理盐水)，五味沙棘散低、中、高剂量组，给药剂量同1.2.1。5组均灌胃给药，1次／d。每天灌药后，除正常对照组不进行烟熏外，其余4组均放入10 000 L自制广口玻璃瓶中，瓶盖留有直径1.5 cIIl通气孔，下口连接一个三通管，另两端分别连接50mL注射器及点燃的香烟，用注射器通过三通管连续吸注香烟烟雾，每次400 mL(瓶中烟雾浓度约为4％)，烟熏30 min。前10 d每日上、下午各烟熏1次，后20 d每Ft下午烟熏1次，连续40次，全程30 d。末次给药24h后，处死小鼠，剪取气管、支气管，用10％甲醛溶液固定，常规石蜡包埋、HE染色，组织条切片，做病理学检查。
1.2.4对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的实验。取雄性小鼠50只，分组及给药剂量同1.2.1。灌胃给药，1次／d，连续5d，末次给药1 h后，给小鼠右耳涂以二甲苯0.05 mL，左耳作自身空白对照。涂抹二甲苯30 min后，将小鼠颈椎脱臼处死，用内颈6 mm打孔器打下左、右双耳相应部位的圆片，迅速在精密天平上称质量，记录右耳片与左耳片质量之差的肿胀度。
1.2.5急性毒性实验[2】取正常小鼠给药观察24 h，小鼠无死亡，无明显中毒反应，活动、皮毛、行为等未见异常。继续给药观察7 d，小鼠无死亡，无明显中毒反应，活动、皮毛、行为等未见异常。记录五味沙棘散最大耐受量(MTD)。
1.3统计学处理实验数据以孟±s表示，采用SPSS统计软件进行统计学处理。以P<0．05为有显著性差异。
2 结果
2.1对氨水所致小鼠咳嗽的影响五味沙棘散低、中、高剂量对氨水引起小鼠引咳嗽潜伏期有明显的延长作用，并均明显减少2 min内的咳嗽次数。与阴性对照组比较具有显著性差异，尤其是中、高剂量组作用明显。
2.2对豚鼠离体气管条的影响阴性对照组相对收缩高度100％，桂龙咳喘宁组(46．3±15．7)％，五味沙棘散低剂量组(91.6±18.4)％，五味沙棘散中剂量组(62.8±22.6)％，五味沙棘散高剂量组(50.5±17.1)％。五味沙棘散中、高剂量组对组胺引起的豚鼠离体气管条收缩均显示出较好的抑制作用，与阴性对照组比较均有显著性差异(P均<0.01)。五味沙棘散低剂量组与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。该实验结果与整体实验一致。
2.3对小鼠慢性支气管炎模型的影响光镜检查制模结果显示，正常对照组：气管、支气管黏膜上皮及壁管结构正常，纤毛结构清晰可见，在纤毛细胞间夹杂有少数杯状细胞，管壁内有少数散在淋巴细胞，胞奖浆内含有丰富线粒体。模型组：气管、支气管黏膜可见部分上皮变性脱落，杯状细胞明显增生。有的黏膜表面被覆盖单层扁平或立方上皮，局部区域发生明显的鳞状上皮化生，细支气管上皮变性，管壁有较多的淋巴细胞浸润等大量慢性炎性细胞浸润。五昧沙棘散低、中、高剂量组：气管、支气管黏膜上皮及壁管呈不同程度的慢性炎症病变，炎症程度均比模型组减轻，细支气管上皮轻度变性或无明显病变。
2.4对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响五味沙棘散低、中、高剂量对二甲苯引起小鼠耳廓肿胀度具有抑制作用，与阴性对照组比较有显著性差异。
2.5急性毒性实验结果五味沙棘散MTD>70 g／kg，相当于正常成人日用药量的140倍以上。表明五味沙棘散毒性很小，较为安全。
3讨论
慢性支气管炎是由于感染或非感染因素引起气管、支气管黏膜炎性变化，临床出现咳嗽、咳痰或气喘等症状。实验结果显示五味沙棘散明显延长氨水刺激小鼠呼吸道黏膜下感受器引起的咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数；抑制组胺引起的豚鼠离体气管平滑肌的收缩；对小鼠慢性支气管炎性病变有明显抑制作用，还有明显抑制小鼠耳廓肿胀度的作用。提示五味沙棘散具有较好的止咳平喘和抗炎作用，且大剂量服用比较安全。为其临床应用提供了一定的实验依据，其他作用机制有待进一步研究。
